施用氮肥是生產上提高茶葉產量與改善品質的重要措施,但過量施氮不僅造成肥料浪費,還會加劇土壤酸化。硝化和反硝化作用是驅動土壤氮循環的核心生物化學過程,未被茶樹吸收利用的氮素在硝化-反硝化作用下以硝酸鹽、N2O、N2形態經徑流、淋溶、氣體排放等多種途徑進入水體或大氣環境,容易引發富營養化、氣候變暖等生態問題(圖1)。長期以來,經典土壤學理論多基于偏中性的溫帶土壤研究,而對在我國亞熱帶地區廣泛分布的酸性茶園土壤中的硝化-反硝化過程的理解并不清晰。
為了明確茶園土壤氮素循環如何響應長期施肥的機制,茶樹營養與養分管理創新團隊在野外長期定位試驗基礎上,通過化學抑制,結合熒光定量PCR和土壤宏基因組等技術,研究了茶園土壤硝化-反硝化作用及其關聯微生物群落對長期不同施氮水平的響應特征,并從微觀角度對其影響機制進行解析。研究結果證實強酸性的茶園土壤可以保持較強的硝化強度,增加氮肥用量能顯著增強土壤硝化潛勢(圖2)。此外,通過測定控制土壤硝化作用快慢的“氨氧化”步驟的兩個關鍵微生物,氨氧化古菌(AOA)和氨氧化細菌(AOB)的相對貢獻,發現隨著氮肥用量增加,氨氧化步驟逐漸從AOA驅動轉變到AOB驅動,即外源氮素(氮肥)會刺激AOB驅動的氨氧化過程(圖2)。長期施氮顯著增強了反硝化活性,茶園土壤反硝化作用潛勢與氮肥用量顯著正相關(圖3A)。參與土壤反硝化過程的相關功能基因(narG、nirK、norB和nosZ)的豐度(圖3B),及關聯微生物群落的種群豐度(圖4)也隨著氮肥用量增加得到顯著升高。
上述研究揭示出長期施氮條件下硝化反硝化作用底物供應的增強,誘導并正向調控關聯微生物群落及相關功能基因表達,是讓茶園土壤在酸化條件下繼續保持氮素快速周轉能力的重要機制。因此,對茶園土壤中的活性氮損失過程,如硝態氮淋溶、氧化亞氮(N2O)排放仍然需要保持高度關注。
研究結果先后發表在Environmental Research 和Science of the Total Environment上,我所楊向德博士為第一作者,馬立鋒和阮建云研究員為通訊作者。該研究得到了中國農業科學院創新工程、國家茶產業技術體系等項目的資助。

圖1 土壤氮循環主要過程

圖2 總硝化、自養硝化、OA和AOB驅動硝化速率對氮肥用量的響應特征及相對貢獻

圖3 施氮水平對土壤反硝化潛勢(A)及相應功能基因(B)豐度的影響

圖4 施氮水平對土壤反硝化關聯微生物群落組成及豐度的影響